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  :::: 보유미생물 > 세균


 

  미생물 중에서 세균은 기초 및 응용분야에 걸쳐 가장 많이 연구되어 왔으며, 생물자원으로서 그 이용 한도가 무한정하다. 그러나 아직 지구상에 존재하는 세균의 1~3%에 못 미치는 발견이 이루어져 있을 뿐이므로 새로 발견될 세균의 종은 매우 다양하고 그 응용범위도 매우 확장되리라 기대된다. 현재 MRDB에서는 호알칼리성과 호염성, 근권세균등 특수환경 미생물군을 분리, 보유하고 있다.  






  세균은 자연계에 널리 분포하고 있으며, 토양(산,강,논,밭,동굴등), 동ㆍ식물체, 하천, 호수퇴적층, 해양관련물 천연물등 여러시료에서 많은 종류가 분리되고 있다.

현재 연구되는 시료는 토양(염전, 갯벌, 습지, 근권...), 식물재료(나뭇잎,뿌리,껍질,줄기등), 곤충재료, 부패음식물등 여러 종류에서 분리하고 있다.
 



  미생물 분류는 주로 외부적인 형태나 특징적인 구조 및 종의 생리 생화학적 특성을 기준으로 시행되어 왔으나 이러한 특성들은 환경의 변화에 따른 변이가 매우 심하며, 학자에 따른 편견이 가미될 소지가 많다. 최근에는 표현형보다는 분자수준의 DNA, RNA 또는 세포벽, 세포막과 같은 세포구성 성분 등 비교적 안정한 세포구성 성분을 대상으로 한 분류가 시도되고 있으며, Data 또한 다량으로 얻어내어 computer를 이용하여 통계 처리함으로써, 자료의 주관적인 해석을 배제하여 보다 정확한 분류를 시도하고 있다.
세균의 다양한 종류만큼 그 세균을 분리하는 방법 또한 매우 다양하며, 각 세균의 특성에 맞는 분리 방법을 이용하여 세균을 분리한다.

시료의 각 희석액 0.1ml씩을 미리 준비한 세균 선택 배지에 도말한 후, 35℃에서 1~2일간 배양한 후 순수분리한다. 분리시에 이용했던 배지와 같은 배지로 다시 이식하여 35℃에서 1~2일간 배양한 후 상이한 세균을 선별한다.
 





  다양한 세균의 분리를 위한 배지로는 R2A agar배지, Marine agar배지, Nutrient agar배지 등이 사용되고 있고, 일반적으로 염전이나 갯벌 시료에서의 세균 분리에서는 주로 Marine agar배지를 이용하고 있다.  

R2A agar medium
Yeast extract 0.5g
Proteose Peptone No.3 0.5g
Casamino acid 0.5g
Dextrose 0.5g
Soluble Starch 0.5g
Sodium Pyruvate 0.3g
Dipotassium Phosphate 0.3g
Magnesium Sulfate 0.05g
Agar 15-20g
pH 7.2

Nutrient agar medium
Beef Extract 3.0g
Peptone 5.0g
pH 6.8

*Alkaliphile 분리시에는 pH 9.5
*Halophile 분리시에는 NaCl 10~15% 첨가
.
Marine agar medium
Peptone 5.0g
Yeast extract 1.0g
Ferric Citrate 0.1g
Sodium Chloride 19.45g
Magnesium Chloride, dried 5.9g
Sodium Sulfate 3.24g
Calcium Chloride 1.8g
Potassium Chloride 0.55g
Sodium Bicarbonate 0.16g
Potassium Bromide 0.08g
Strontium Chloride 0.34mg
Boric Acid 22.0mg
Sodium Silicate 4.0mg
Sodium Fluoride 2.4mg
Ammonium Nitrate 1.6mg
Disodium Phosphate 8.0mg
Agar 15-20g
pH 7.6





  분리에 이용되었던 배지와 동일한 배지를 이용하여 보존한다.  

R2A agar medium
Yeast extract 0.5g
Proteose Peptone No.3 0.5g
Casamino acid 0.5g
Dextrose 0.5g
Soluble Starch 0.5g
Sodium Pyruvate 0.3g
Dipotassium Phosphate 0.3g
Magnesium Sulfate 0.05g
Agar 15-20g
pH 7.2

Nutrient agar medium
Beef Extract 3.0g
Peptone 5.0g
pH 6.8

*Alkaliphile 보존시에는 pH 9.0
*Halophile 보존시에는 NaCl 10% 첨가
.
Marine agar medium
Peptone 5.0g
Yeast extract 1.0g
Ferric Citrate 0.1g
Sodium Chloride 19.45g
Magnesium Chloride, dried 5.9g
Sodium Sulfate 3.24g
Calcium Chloride 1.8g
Potassium Chloride 0.55g
Sodium Bicarbonate 0.16g
Potassium Bromide 0.08g
Strontium Chloride 0.34mg
Boric Acid 22.0mg
Sodium Silicate 4.0mg
Sodium Fluoride 2.4mg
Ammonium Nitrate 1.6mg
Disodium Phosphate 8.0mg
Agar 15-20g
pH 7.6





  분리와 보존에 이용되는 배지와 같은 종류의 배지를 이용해도 무관하나, 보다 효과적인 배양을 위해 현재 Trypic Soy Broth(TSB) medium을 기본으로 세균을 배양하고 있다.  

Trypic Soy Broth medium
Pancreatic Digest of Casein 17.0g
Enzymatic Digest of Soybean Meal 3.0g
Dextrose 2.5g
Sodium Chloride 5.0g
Dipotassium Phosphate 2.5g
pH 7.3

*Alkaliphile 배양시에는 pH 9.0
*Halophile 배양시에는 NaCl 10% 첨가
. .





년 도 균 주
2003   030001 - 031890 (1890 주)
누 계1890 주
 
년 도 배양액
누 계 시료





 
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