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  :::: 보유미생물 > 곰팡이


 


  현재 미생물자원데이터베이스에서 보유하고 있는 미생물군으로는 무상으로 지원하는 방선균 및 곰팡이군이 있고, 기타 미생물군 으로서는 담자균류, myxobacteria와 고온성, 호알카리성,호염성,저영양성 세균 등 특수환경 미생물군이 있습니다.  








  곰팡이는 자연계에 널리 분포하고 있으며, 토양(산,강,논,밭,동굴등), 식물체, 하천, 호수퇴적층, 해양관련물 천연물등 여러시료에서 많은 종류가 분리되고 있다. 특히 토양중에서 다종 다양한 곰팡이가 분리되고 있다. 그리고 곰팡이의 존재빈도, 종류는 수분, pH, 온도, 심도, 산소농도, 동식물 유래의 유기물함량 등에 의해서 좌우된다.

현재 연구되는 시료는 토양(산,강,바다,논,밭,동굴...), 식물재료(나뭇잎,뿌리,껍질,줄기등 여러부위), 곤충재료, 부패음식물등 여러 종류에서 분리하고 있다
 




  1) 희석평판법 : 주로 토양유래의 균주 분리에 유리

시료의 각 희석액 0.1ml씩을 PDA, L.O 배지에 도말한 후 28oC에서 7일간 배양한 후 single colony를 Malt extract Agar medium에 다시 이식하여 28oC에서 7일간 배양한 후 상이한 곰팡이 균주를 선별하고 있다.

2) 직접접종법 :

분리원을 한천배지의 중앙에 놓고, 분리원 혹은 그 주위에 신장되어 나오는 균주를 광학현미경으로 관찰하면서 분리. 배지는 빈약한 영양배지가 유리하다.

3) 낚시미끼법 :

목적하는 분리 균주에 적합한 기질을 채집해 온 시료에 넣어서 균이 생육되기를 기다려 분리하는방법. 첨가하는 기질을 변화시킴으로서 선택적으로 특정한 균주를 분리할 수 있다.

4) 직접관찰법 :

습도를 유지한 petri dish에 균분리원을 놓고 기질상에 출현하는 균주를 광학현미경으로 관찰하면서 분리하는 방법.

5) 단포자분리법 :

수생불완전균류, 해생균류등의 분리에 유효한 방법.
 







  곰팡이 분리용배지로는 Czapek`s agar, 20% sucrose czapek`s agar, PDA, L.O 배지등이 이용되고 있다현재는 다양한 곰팡이균을 분리할 목적으로 PDA, L.O배지를 사용하여 분리하고 있습니다.  

Potato dxtrose agar (PDA)
Potato dxtrose broth 20g
Agar 18g
Chloram phenicol 50ppm
Nalidixic acid 20ppm
D.W 1L
 
 


Czapek`s agar
NaNO3 3g
K2HPO4 1g
MgSO4.7H2O 0.5g
KCl 0.5g
FeSO4.7H2O 0.01g
Sucrose 30g
Chloram phenicol 50ppm
Nalidixic acid 20ppm
Agar 18g
D.W 1L
 
Littman oxgall agar
Glucose 10g
Oxgall 15g
Pepton 1g
Agar 18g
Chloram phenicol 50ppm
Nalidixic acid 20ppm
D.W 1L


20% Sucrose czapek`s agar
NaNO3 3g
K2HPO4 1g
MgSO4.7H2O 0.5g
KCl 0.5g
FeSO4.7H2O 0.01g
Sucrose 200g
Chloram phenicol 50ppm
Nalidixic acid 20ppm
Agar 18g
D.W 1L






Malt extract agar
Glucose 20g
Malt extract 20g
Peptone 1g
Agar 18g
DW 1L
 
Potato dxtrose agar (PDA)
Potato dxtrose broth 20g
Agar 18g
D.W 1L
 
 







  분리된 균주는 YpSs배지를 250ml baffled 삼각 flask에 25ml씩 넣고 28oC,145rpm의 조건하에서 7일간 배양하여 배양액과 acetone을 1:1비율로 섞어 추출후 보존, 분양하고 있습니다. (50% acetone 추출상태)

# 곰팡이가 분비하는 extracellular 효소를 스크리닝 할 경우 acetone을 처리하기전 분양 받을 수 있습니다. 이 경우 미리 신청을 바랍니다.
 

YpSs medium
Glucose 20g
Yeast extract 2g
Peptone 5g
MgSO4.7H2O 0.5g
KH2PO4 1g
D.W 1L
pH 5.6-5.8

0
Yeast-malt extract medium
Yeast extract 3g
Malt extract 3g
Peptone 5g
Glucose 10g
D.W 1L
 
 
0
Wheat bran medium
Wheat Bran 1000g
D.W 1L
 
 
 
 
 






년 도 균 주
1994   40201 - 40424 (224 주)
1995   50954 - 51357 (404 주)
1996   60001 - 60940 (904 주)
1997   70001 - 71289 (1289 주)
1998   80001 - 80997 (997 주)
1999   90001 - 91225 (1225 주)
2000   000001 - 000974 (974 주)
2001   010001 - 010802 (802 주)
2002   020001 - 020613 (613 주)
2003   030001 - 030423 (423 주)
2004   FA040001~122,FH04020~38,FH040501~521,FT040001~79 (164 주)
2005   F060001~F060132 (132 주)
2006   F060001~F0600238 (238 주)
2007   FN070001~FN070623 (623 주)
2008   FN080001~FN080971 (971 주)
2009   FN090001~FN090507 (507 주)
누 계10490 주
 
년 도 배양액
1995   B50954 - B51357 (404 시료)
1996   F60001 - F60940 (940 시료)
1996   B60001 - B60940 (940 시료)
1997   F70001 - F71289 (1289 시료)
1997   B70001 - B70590 (590 시료)
1998   F80001 - F80997 (997 시료)
1999   F90001 - F91225 (1225 시료)
1999   B90501 - B91225 (725 시료)
2000   F000001 - F000974 (974 시료)
2000   B000001 - B000974 (974 시료)
2001   F010001 - F010802 (802 시료)
2001   B010001 - B010802 (802 시료)
2002   F020001 - F020613 (613 시료)
2002   B020001 - B020613 (613 시료)
2004   FA040001~122,FH04020~38,FH040501~521,FT040001~79 (149 시료)
2005   F060001~F060132 (120 시료)
2006   F060001~F0600238 (224 시료)
2007   FN070001~FN070623 (623 시료)
2008   FN080001~FN080971 (971 시료)
2009   FN090001~FN090507 (507 시료)
누 계14482 시료

  B: Wheat bran medium
Y: YM medium, YpSs medium
 








...






   1. 항균활성 시험균주

  Test microorganisms Abbreviations
Gram negative
bacteria
Escherichia coli BE KCTC 1924 Salmonella typhimurium KCTC 1926 BE
SL
Gram positve bacteria staphylococcus aureus KCTC1916 Staphylococcus aureus KCTC 1928 Bacillus Subtilis KCTC 1914 209
R-209
B
Yeast Candida albicans KCTC 1940
Chlorella regularis
Aspergillus flavus
C


  2. 곰팡이의 배양액을 paper disc(직경 8mm)에 60㎕씩 흡수시켜 각 시험균주가 도말된 plate에 올려놓고 24시간 후 생성된 투명환의 직경을 측정하여 항균활성을 조사하고 그 data를 종합하고 각 연구자들에게 정보를 제공하고 있습니다.

3. 항균활성 data 등 각종 생리활성 스크리닝결과는 검색지원〉생물활성에서 검색이 가능합니다.